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瓊脂糖凝膠電泳

  • 瓊脂糖凝膠電泳是一種用于生物化學,分子生物學,遺傳學和臨床化學的凝膠電泳方法,用于分離瓊脂糖基質中的大分子(例如DNA,RNA或蛋白質)的混合群體。
  • 瓊脂糖是從海藻中提取的天然線性聚合物,當在緩沖液中加熱并冷卻后,可通過氫鍵形成凝膠基質。
  • 它們是用于分離中型和大型核酸的**受歡迎的介質,并且具有廣泛的分離范圍。

瓊脂糖凝膠電泳原理

凝膠電泳可在固體支持介質(如瓊脂糖凝膠)中按大小分離DNA片段。將樣品(DNA)吸移到樣品孔中,然后在陽極負端施加電流,該電流使帶負電荷的DNA向(陰極,正)端遷移(電泳)。遷移速率與大小成正比:較小的碎片移動得更快,并在凝膠底部纏繞。 

通過在凝膠中包含嵌入染料溴化乙錠,可以看到DNA。DNA片段在凝膠中遷移時會吸收染料。紫外線的照射使插入的染料發出熒光。

較大的碎片發出更強烈的熒光。盡管單類分子的每個片段均以等摩爾比例存在,但較小的片段包含的DNA質量較小,吸收的染料較少,因此發出的熒光較少。可以同時運行一組“梯形”已知大小的DNA片段,并將其用于估計其他未知片段的大小。

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