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在PCR擴增過程中控制污染:制備最佳實踐

PCR擴增對污染極其敏感,污染可能會導致結果不正確。這可能令人沮喪和困惑,尤其是如果您知道引物和模板正確,并且具有預期擴增子的確切長度,則尤其如此。模板,基因組DNA或先前反應中的擴增子對試劑的污染會導致過多或意外的信號。良好的實驗室規范可以每次幫助控制污染并確保準確的結果。

實驗室**佳實踐

  • **大限度地減少基因組DNA來源的潛在暴露。摻入DNase以降解DNA鏈,并確保您的引物跨越兩個外顯子。此外,通過將“ no-RT”控件整合到實驗中,您可以快速識別RNA制備物中的污染物。
  • 創建單向工作流。在單獨的干凈空間中進行準備的每個步驟,以防止殘留污染。將酶,水,引物和探針以及其他配件存放在沒有隔離或存儲模板的房間中。
  • 集成無塵室和層流柜以保護樣品。無塵室和設備可以幫助防止各種外部污染。
  • 使用過濾器提示進行所有移液操作。過濾嘴可在移液器和被測液體之間提供屏障,防止潛在的氣溶膠殘留。

PCR無管設備

PCR層流柜可以通過采用HEPA過濾技術幫助維持無污染的環境,同時還可以靈活地訪問柜中的儀器。PCR通風柜是獨立設備,可在幾乎任何實驗室空間內快速安裝,而無需昂貴的管道系統或復雜的接線。

無管層流通風柜是為臺式使用而設計的,也可以放置在底座或移動推車上以方便使用。內部空氣處理系統的流速為90 fpm,可有效地將潛在的污染物從PCR混合物中帶走,而HEPA過濾器對0.3微米顆粒的效率高達99.99%。

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